Повышенный уровень транскобаламина белка переносчика витамина в12

Молекула витамина В12 (цианкобаламин) состоит из двух частей:
а) хориновой — порфирин, в котором 4 восстановленных пирола связаны тремя мостиками метена и одной прямой связью, при этом к внешним позициям прикреплены радикалы, такие как аминоэтанол, аминопропанол и метил, в то время как в центре расположен атом кобальта, с которым связана группировка циан (свреху) и нуклеотидная часть (под хориновым планом);

б) нуклеотидной, в состав которой входят 5,6-диметилбензимидазол (а), рибоз (b) и фосфат (с) (которая осуществляет связь с пропионовым радикалом пирола D). Заменой связанных с кобальтом радикалов образуются различные производные (естественные и синтетические); при этом коферментной активностью обладают лишь высокозаменяемые произволные, в которых группа —С—N заменяется радикалом 5′-дезоксиаденозил или метил.

В качестве кофермента 5′-дезоксиадеознилкобаламин является межмолекулярным (реакция восстановления) или внутримолекулярным (реакция изомеризации) переносчиком водорода. Был обнаружен целый ряд реакций подобного типа, однако из них, у млекопитающих и человека, доказано наличие лишь реакции изомеризации метил-малонил-СоА в сукцинил-СоА в процессе метаболизма пропионовой кислоты (Silber и Moldow).

Реакцию восстановления рибонуклеотидов в дезоксирибонкулеотиды, обнаруженную в отдельных микроорганизмах, посредством которой можно было бы объяснить мегалобластоз за счет дефицита BJ2 независимым от метаболизма фолатов путем, еще не удалось доказать у человека (тем не менее добавление тимидина может преобразовать мегалобласты в нормобласты только при недостатке фолиевой кислоты; исключаются случаи дефицита витамина В12).

В бактериях метилкобаламин участвует в различных реакциях синтезирования, выполняя роль переносчика радикала метил. У человека доказано наличие лишь реакции метилирования гомоцистеина (в одном из путей синтезирования метионина). Поскольку источником группы метил является метилтетрагидрофолат, эта реакция составляет одновременно путь к «регенерации» тетрагидрофолиевой кислоты (FH4) из метил-тетрагидрофолиевой кислоты, что служит признанным в настоящее время объяснением мегалобластоза за счет дефицита витамина В12.

При этом теория «капкан метилфолата» (Nixon и Bertino) составляет другое последствие дефицита витамина В12, заключающееся в недостаточной задержке клетками метилтетрагидрофолиевой кислоты (Тисман и Герберт).

Дозировка витамина В12 осуществляется бактериологическими методами, при этом применяется либо фотометрическое измерение роста численного показателя отдельных микроорганизмов, находящихся в зависимости от этого витамина (Lactobacillus leishmanii, Euglena gracilis и пр.), когда вступают в контакт с материалом реакции, либо метод радиоактивных изотопов.

Кругооборот витамина В12 в организме человека

Витамин В12 синтезируется отдельными микроорганизмами, находящимися в почве, воде, на кормовых растениях или в пищеварительном тракте животных, далее витамин поступает в ткани (в частности в железы, печень, мышцы, также, яйца, в меньшей мере в молоко), которые составляют основной источник для человека.

Из 5—30 мкг среднесуточного подвоза с пищей поглощаются лишь 1—5 мкг, остальное количество выделяется с испражнениями. За сутки теряются примерно 2,5 мкг витамина В12 (Hellmuth), составляющие, следовательно, суточную потребность. Его передача плоду, в период беременности, различные гиперметаболические состояния, в период роста и пр. увеличивают потребность.

Поглощение витамина В12 обусловлено наличием внутреннего фактора (ВФ), который связывает находящийся в пищевых продуктах витамин В12 и затем переносит его к кишечным рецепторам.

Схематическое изображение синтеза коферментов и их метаболической активности.
Приводятся два последовательных восстановительных процесса гидроксокобаламина (1), (2), образование 5′-дезоксиаденозил-В12 (3) и его участие в метаболизме пропионовой кислоты (4); образование метип-В12 (5), его «каталитическая» функция в переносе группы — СН3 от метил-FH4 к гомоцистеину (пусковая роль s-аденозилметионина в реакции и «регенерации’» кофермента), также взаимосвязь с метаболизмом фолатов (6) и серных аминокислот (7).

Внутренний фактор это, по существу, гликопротеид, который, у человека, выделяется пристеночными клетками слизистой оболочки дна желудка. Этот фактор отличается свойством осуществлять специфическую связь (при кислом рН) того небольшого количества В12, которое выделяется в результате пептического пищеварения.

Далее, при нейтральном рН и наличии Са2+ комплекс ВФ-В12 закрепляется на специальных рецепторах слизистой оболочки подвздошной кишки, где витамин диссоциируется а затем, с помощью еще не выведенного механизма, переходит в воротновенную кровь (Састле).

При введении большого количества витамина В12 его поглощение осуществляется путем пассивной диффузии (с быстрым поступлением в кровь) в размере примерно 1% назначенной дозы (Hellmuth).

Перенос с плазмой витамина В12 осуществляется посредством транскобаламина (прежде называемого транскобаламин II), связывающего поглощаемый из кишечника и частично эндогенный витамин В12, равно как кобалофилина (современное название «белков вида Р », включающих транскобаламин I и III), переносящего наибольшую часть эндогенного витамина В12. При хронической гранулоцитной лейкемии, а иногда и гепатомах показатель кобалофилина значительно растет. Недавно был выявлен внутриклеточный белок, связывающий кобаламин (Stenman).

Нормальная концентрация витамина В12 в плазме колеблется от 200 до 900 пг/мл.

Запасы витамина В12 в организме взрослого человека составляют примерно 2000—5000 мкг, причем в основном он сохраняется в печени (примерно 1000 мкг) и в меньшей мере в почках; мышцы содержат примерно 3000 мкг этого витамина.

Витамин В12 выделяется с мочой в незначительном количестве (примерно (0,25 мкг/сутки). Видимо его выделение через кишечник составляет основную причину потерь (доказано наличие кишечно-печеночного кругооборота с повторным поглощением примерно 3/4 выделяемого с желчью витамина В12), к этому следует добавить выпадение клеток желудочно-кишечного эпителия, выделения пищеварительной системы и пр.

Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021

Источник

Повышенный уровень транскобаламина белка переносчика витамина в12

В наши дни дефицит витамина В₁₂ является глобальной проблемой.

Он наблюдается примерно у 5 % взрослых, из которых 5 % находятся в возрасте 65−74 лет, а 10 % − старше 75 лет.

Главная функция витамина В₁₂ (кобаламина) в человеческом организме − нормальное кроветворение. Его дефицит является причиной мегалобластической анемии и неврологических нарушений. Витамин В₁₂ не синтезируется в организме, его получают с пищей (продукты питания животного происхождения).

Клинические признаки и симптомы дефицита витамина В₁₂ являются общими, поэтому дефицит легко можно не заметить:

слабость, усталость, головокружение;
нечувствительность конечностей.

В сыворотке витамин В₁₂ связан с двумя белками: транскобаламином и гаптокоррином. Комплекс транскобаламина и витамина В₁₂ называют голотранскобаламином (holoTC). HoloTC содержит биологически доступный (активный) кобаламин, потому что только holoTC, воздействуя на специфические рецепторы, способствует приему кобаламина во всех клетках. И наоборот, примерно 80 % циркулирующего кобаламина (витамина В₁₂), который в сыворотке переносится гаптокоррином (holoHC), считаются метаболически инертными (неактивными), так как у гаптокоррина нет специфических клеточных рецепторов, за исключением тех, что находятся в печени.

Генетически определенный недостаток гаптокоррина встречается редко и не считается серьезным состоянием. Напротив, генетически определенный недостаток или дефект транскобаламина проявляется в виде типичных, характерных для дефицита кобаламина гематологических, неврологических и метаболических патологий, которые необходимо лечить, даже если анализы сыворотки показывают нормальную концентрацию кобаламина.

У holoTC период полураспада короче, чем у гаптокоррина (holoHC), поэтому уменьшение концентрации holoTC является одним из самых ранних показателей дефицита кобаламина (витамина В₁₂).

В нормальном состоянии уровень витамина В₁₂ в сыворотке должен соответствовать его уровню в тканях, но недостаточность транспортного белка (транскобаламина) может показать низкий уровень витамина В₁₂ в сыворотке, несмотря на то, что в тканях уровень нормальный, или низкий уровень витамина В₁₂ в тканях, если в сыворотке уровень нормальный.

Часто уровень витамина В₁₂ достигает предельных величин (190–300 пг/мл – серая зона). Более 20 % этих пациентов старше 60 лет. С возрастом способность абсорбировать витамин В₁₂ снижается – это связано с атрофическими изменениями слизистой оболочки желудка; распространенность увеличивается, так как в мире растет средний возраст населения. Это объясняет ситуации, когда при определении общего количества витамина В₁₂ оно может быть в пределах нормы (в серой зоне), но при определении уровня активного витамина В₁₂ его количество оказывается пониженным и наталкивает на мысли о дефиците витамина В₁₂.

Определение уровня общего кобаламина в сыворотке (общего витамина В₁₂) имеет некоторые ограничения, из которых особенно следует отметить то, что большая часть определяемого кобаламина связана с гаптокоррином. Поэтому для того, чтобы при диагностировании заболевания мы получили истинное представление о содержании витамина В₁₂ в организме, важно определить биологически активный витамин В₁₂ (голотранскобаламин). Многие опубликованные исследования указывают на то, что holoTC является лучшим индикатором обеспечения витамином В_12, чем общий кобаламин в сыворотке.

Предполагается, что у пациентов с биохимическими признаками дефицита витамина В₁₂ уровень holoTC является низким. Особенно низкие значения наблюдаются у вегетарианцев, веганов и пациентов, недополучающих витамин В₁₂ с пищей. Кроме того, низкий уровень holoTC (но не общего витамина В₁₂) наблюдается у пациентов с болезнью Альцгеймера.

С началом дополнительного приема витамина В₁₂ увеличение количества активного витамина В₁₂ (holoTC) можно наблюдать уже в первый день терапии. Увеличение количества holoTC является индикатором получения соответствующей дозы витамина В₁₂

Преимущества определения активного витамина В₁₂:

holoTC показывает только количество биологически активного витамина В₁₂ в сыворотке;
уровень holoTC отражает статус обеспечения организма витамином В₁₂ независимо от недавно абсорбированного количества витамина В_12;
holoTC является намного более чувствительным и специфичным показателем, чем общий витамин В₁₂;
у holoTC нет взаимовлияния с IF-антителами (IF – внутренний фактор), что является проблемой в случае с общим витамином В₁₂;
изменение количества holoTC в сыворотке проявляется быстрее, чем в случае общего витамина В₁₂.

Исследуемый материал: кровь без антикоагулянта (красная или желтая пробирка).

Время хранения крови: образец нужно центрифугировать не позднее чем через 2 часа после забора крови. Можно хранить в холодильнике до 72 часов. Для более длительного хранения кровь замораживают.

Стоимость теста – 12,95 EUR.

Источник

Витамин В12, активный (холотранскобаламин)

Витамин В12 (цианокобаламин) – это водорастворимый витамин, который играет важную роль в нормальном функционировании нервной системы и формировании клеток крови. Его дефицит может вызвать серьезные изменения в организме. Кобаламин в сыворотке крови связан с двумя белками, транскобаламином (TК) и гаптокоррином (ГК). Комплекс транскобаламин — кобаламин называется холотранскобаламином (ХолоТК), или активным B12. Более значительная фракция (около 80 %) кобаламина, переносимая ГК (ХолоГК), считается метаболически неактивной, так как только в печени имеются клеточные рецепторы к ней. Активный B12 содержит биологически доступный кобаламин, так как только связанный транскобаламином B12 обеспечивает доступ кобаламина во все клетки через специфические рецепторы. Из-за более короткого периода полувыведения активного B12, чем у ХолоГК, снижение уровня активного B12 является одним из самых ранних маркеров дефицита кобаламина.

Тест на витамин В12, активный (ХолоТК) может применяться как вторичный, после определения общего уровня B12, или как основной.

Диапазон определения: 5,0 — 256,0 пмоль/л.

Пмоль/л (пикомоль на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не принимать пищу в течение 4 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Витамин B12 (кобаламин) в сыворотке крови связан с двумя белками: транскобаламином (ТК) и гаптокоррином (ГК). Комплекс транскобаламин — витамин B12 называется холотранскобаламином (ХолоТК). ХолоТК содержит биологически доступный кобаламин, так как только он обеспечивает поступление кобаламина во все клетки через специальные рецепторы. Для сравнения: приблизительно 80 % кобаламина, переносимого HC, считается метаболически неактивными, потому что не существует специальных рецепторов клетки, кроме рецепторов в
печени. Генетическое отсутствие HC встречается редко и не рассматривается как серьезное состояние, о днако генетическое отсутствие или отклонения от нормы TC обычно свидетельствуют о гематологических, неврологических и метаболических патологиях дефицита кобаламина, требующих интенсивной терапии, даже если результаты анализа сыворотки крови показывают нормальные концентрации кобаламина.

Более короткий период полураспада циркулирующего ХолоТК по сравнению с периодом полураспада хологаптокоррина (ХолоГК) делает снижение уровня ХолоТК одним из самых ранних маркеров дефицита кобаламина. Измерения уровня общего кобаламина в сыворотке крови имеют ряд ограничений, в частности большая часть измеряемого кобаламина связана с ГК. В ряде опубликованных исследований утверждается, что ХолоТК является лучшим индикатором статуса витамина B12, чем общий кобаламин в сыворотке крови. Были разработаны методики на основе специфических антител к антиTC, подтверждающие полезность ХолоТК в диагностике дефицита B12. Как и предполагалось, у пациентов с биохимическими признаками дефицита витамина B12 уровни ХолоТК низкие. В частности, сообщалось
о низких значениях у вегетарианцев, веганов и у населения с низким потреблением витамина B12. Кроме того, сообщалось о более низких уровнях ХолоТК (но не витамина B12) в сыворотке крови у пациентов с синдромом Альцгеймера по сравнению с уровнями ХолоТК у контрольной группы здоровых людей. Уровни ХолоТК являются отражением статуса витамина B12, независимым от недавнего потребления витамина.

Для чего используется исследование?

Определение холотранскобаламина в сыворотке крови в рамках диагностики и лечения дефицита витамина B12; как ранний маркер дефицита кобаламина.

Когда назначается исследование?

Как вторичное тестирование — при риске дефицита B12:
- вероятность дефицита — B12
- разрешение сомнительных результатов на B12 — B12 = 150-250 пмоль/л.
Как основное тестирование — подозрение на дефицит кобаламина.

Что означают результаты?

Референсные значения: 25,1 — 165 пмоль/л.

Витамин В12, активный (ХолоТК) ефицит или недостаток кобаламина.

Витамин В12, активный (ХолоТК) > 35 пмоль/л — о тсутствие дефицита кобаламина; п ациенты с заболеваниями почек с такими концентрациями
ХолоТК должны быть далее обследованы на MMК (метилмалоновая кислота), высокие уровни MMК, несмотря на нормальные уровни ХолоТК, могут указывать на внутриклеточный дефицит кобаламина, который может быть подтверждён понижением уровней MMК при приёме препарата B12.

Измерение уровня витамина В12, активного (ХолоТК) даёт более точный индекс статуса B12, чем измерение уровня общего витамина B12.
Измерение уровня витамина В12, активного (ХолоТК) повышает чувствительность и специфичность раннего определения дефицита B12 у пациентов по сравнению с определением уровней общего В12 в сыворотке крови.

Кто назначает исследование?

Гематолог, терапевт, невролог, диетолог, гастроэнтеролог, онколог.

Литература

Nexo E, Hvas A-M, Bleie Ø, et al. Holotranscobalamin is an early marker of changes in cobalamin homeostasis. A randomized placebo-controlled study. Clin Chem 2002;48(10):1768-1771.
Valente E, Scott JM, Ueland P-M, et al. Diagnostic accuracy of holotranscobalamin, methylmalonic acid, serum cobalamin, and other indicators of tissue vitamin B 12 status in the elderly. Clin Chem 2011;57(6):856-863.
Nexo E, Christensen A-L, Hvas A-M, et al. Quantification of holotranscobalamin, a marker of vitamin B 12 deficiency. Clin Chem 2002;48(3):561-562.
Ulleland M, Eilertsen I, Quadros EV, et al. Direct assay for cobalamin bound to transcobalamin (holo-transcobalamin) in serum. Clin Chem 2002;48(3):526-532.

Источник